平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)

產(chǎn)品詳情

用于**總數(shù)的測定

 平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA）                         1KG          

組成（1000ml）：

胰蛋白胨

5.0g

葡萄糖

1.0g

酵母浸粉

2.5g

瓊脂

15.0g

pH7.0±0.2(25℃)

用法：  

    稱取本品23.5g于1L蒸餾水或去離子水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝，121℃高壓**15分鐘,**結(jié)束后請搖勻，以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固，備用。

質(zhì)控方法：

理化檢測

干粉（淡黃色）；水分（≤5%）；溶液（淡黃色，澄清透明）；

強(qiáng)度（350~500g/cm2）；pH（7.0±0.2）

生長檢測

以合格品為對照，傾注操作，計(jì)數(shù)相差10%內(nèi)，36±1℃培養(yǎng)48±2小時(shí)

劃線金黃色葡萄球菌與銅綠假單胞菌，有色素產(chǎn)生

菌種名稱

接種量

生長特征

大腸埃希氏菌ATCC25922

30~150CFU

菌落直徑與對照相仿，計(jì)數(shù)相差10%以內(nèi)

金黃色葡萄球菌ATCC25923

30~150CFU

產(chǎn)黃**素，菌落直徑與對照相仿，計(jì)數(shù)相差10%以內(nèi)

枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501

30~150CFU

菌落直徑與對照相仿，計(jì)數(shù)相差10%以內(nèi)

銅綠假單胞菌ATCC27853

30~150CFU

產(chǎn)綠**素，菌落直徑與對照相仿，計(jì)數(shù)相差10%以內(nèi)

奇異變形桿菌ATCC12453

30~150CFU

菌落直徑與對照相仿，計(jì)數(shù)相差10%以內(nèi)

自來水

30~300CFU

菌落直徑與對照相仿，計(jì)數(shù)相差10%以內(nèi)

平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)使用方法:

 稱取本品15.0g于1L蒸餾水或去離子水中，加熱煮沸至完全溶解，分裝，121℃高壓**15分鐘,備用。

常用培養(yǎng)基及基本特性

1、RPMI-1640 Medium

RPMI-1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成**細(xì)胞、T細(xì)胞**瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。

2、Minimum Essential Medium（MEM）

也稱*低必需培養(yǎng)基，它僅含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。MEM-Alpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型，而其它沒有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。

3、DMEM-高糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng),更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。

4、DMEM-低糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。

5、DMEM/F12

DMEM/F12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結(jié)合，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基（DME/F12medium），作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ)，以利用F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點(diǎn)。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)為了增強(qiáng)該培養(yǎng)基的緩沖能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES緩沖液。

6、McCoy’s 5A

McCoy’s 5A Medium 主要為肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所設(shè)計(jì)，可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些**細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人**細(xì)胞、HT-29、BHL-100等上皮細(xì)胞。

7、Iscove’s Modified Dulbecco Medium (IMDM)

Guilber 和Iscove將Dulbecco’Medium 改良為 Iscove’s Medium，用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B**細(xì)胞，LPS刺激的B細(xì)胞，骨髓造血細(xì)胞，T細(xì)胞和**瘤細(xì)胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液，因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。

8、M-199 Medium

1950年，Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液，即M-199，主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。平板計(jì)數(shù)瓊脂(PCA)此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞，并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。

9、Leibovitz Medium （L-15）

L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進(jìn)一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

10、Ham’s F-10培養(yǎng)基：適應(yīng)小鼠細(xì)胞、人類二倍體的培養(yǎng)。

11、Ham’s F-12培養(yǎng)基：可以在加入很少血清的情況下應(yīng)用，特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)，是無血清培養(yǎng)中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)液。

12、William’s Medium E：用于大鼠肝上皮細(xì)胞的長期細(xì)胞培養(yǎng)。

13、MCDB 131 培養(yǎng)液：用于培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞。

14、Opti-MEM I Reduced Serum Media：用于培養(yǎng)造血細(xì)胞。

15、植物血凝素（PHA）：增加細(xì)胞轉(zhuǎn)化和DNA合成。